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日立離心機(jī)售后維修,區(qū)帶轉(zhuǎn)子離心原理

當(dāng)我們需要對一些病毒顆粒(病毒載體、病毒性疫苗)進(jìn)行分離純化的時候,超速密度梯度離心是其中一種選擇。通常會使用不同的密度介質(zhì)液(蔗糖,氯化銫CsCl), 形成密度梯度,超速離心過程中,樣品根據(jù)各自的密度差異或者沉降速度差異,移動到梯度中不同位置而形成區(qū)帶,使得不同顆粒得以分離。

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常規(guī)超速離心機(jī)的轉(zhuǎn)子一般分為水平轉(zhuǎn)子,角轉(zhuǎn)子,垂直轉(zhuǎn)子和近垂直轉(zhuǎn)子。在病毒顆粒分離中,由于轉(zhuǎn)速要求一般較高,往往這些常規(guī)轉(zhuǎn)子的總液體處理量有一些局限性(通常≤500 mL), 考慮到密度梯度液的體積,往往樣品的處理通量可能會更小(≤200 mL)。

Eppendorf 超速離心機(jī)中其實還有一種處理通量相對較大的選擇:區(qū)帶轉(zhuǎn)子 P32ZT。 該轉(zhuǎn)子擁有1.69 L處理通量,腔室被從十字隔板劃分為四個扇形區(qū)室, 阻止溶液在離心池中旋轉(zhuǎn),葉片上有徑向?qū)Ч埽芤和ㄟ^導(dǎo)管從中心流向轉(zhuǎn)子體外壁。

左:區(qū)帶轉(zhuǎn)子P32ZT 右:區(qū)帶轉(zhuǎn)子P32ZT腔室內(nèi)部

區(qū)帶轉(zhuǎn)子跟常規(guī)轉(zhuǎn)子不同的是,區(qū)帶轉(zhuǎn)子上樣和卸樣過程,一般是在2000 rpm – 3000 rpm 運轉(zhuǎn)中進(jìn)行的。在上樣過程中,首先將較輕的密度梯度液通過密封組件泵入到轉(zhuǎn)子內(nèi),密度梯度液會在轉(zhuǎn)子外壁的垂直方向形成均勻的一層,然后一次加入密度逐漸遞增的密度梯度液,在轉(zhuǎn)子中逐步形成一個類線性的密度梯度溶液。帶密度梯度液泵入結(jié)束后,再將所需分離的樣品通過密封組件泵入到轉(zhuǎn)子中。

樣品上樣結(jié)束后,會將密封組件移除,然后蓋上轉(zhuǎn)子蓋,關(guān)閉離心腔門。離心機(jī)加速到設(shè)定轉(zhuǎn)速后進(jìn)行分離。目標(biāo)樣品和雜質(zhì)會進(jìn)入到不同的區(qū)帶中,從而實現(xiàn)分離。

離心完畢后,卸樣過程中,需要將轉(zhuǎn)速降至2000 rpm – 3000 rpm, 然后安裝上密封組件

通過泵入較重的密度梯度液,使得轉(zhuǎn)子體內(nèi)的液體從輕到重依次被擠出。通過收集不同的樣品,將樣品進(jìn)行檢測后,確認(rèn)目標(biāo)樣品所在的區(qū)帶。

綜上所述,P32ZT 區(qū)帶轉(zhuǎn)子非常適合高 RCF 的長時間密度梯度離心,用于批次處理,廣泛應(yīng)用于病毒分離、疫苗生產(chǎn)等。

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